低温生物菌种的滤纸保藏法

(1)将滤纸剪成0.5×1.2cm的小条，装入0.6×8cm的安瓿管中，每管1-2张，塞以棉塞，1.05kg/cm2>，121.3℃灭菌30分钟。

(2)将需要保存的菌种，在适宜的斜面培养基上培养，使充分生长。

(3)取灭菌脱脂牛乳1-2ml滴加在灭菌培养皿或试管内，取数环菌苔在牛乳内混匀，制成浓悬液。

(4)用灭菌镊子自安瓿管取滤纸条浸入菌悬液内，使其吸饱，再放回至安瓿管中，塞上棉塞。

(5)将安瓿管放入内有二磷作吸水剂的干燥器中，用真空泵抽气至干。

(6)将棉花塞入管内，用火焰按图Ⅶ-13熔封，保存于低温下。

(7)需要使用菌种，复活培养时，可将安瓿管口在火焰上烧热，滴一滴冷水在烧热的部位，使玻璃破碎，再用镊子敲掉口端的玻璃，待安瓿管开启后，取出滤纸，放入液体培养基内，置温箱中培养。

细菌、酵母菌、丝状真菌均可用此法保藏，前两者可保藏2年左右，有些丝状真菌甚至可保藏14-17年之久。此法较液氮、冷冻干燥法简便，低温生物菌种哪家好，不需要特殊设备。

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       微生物在使用和传代过程中常常容易发生污染、变异甚至死掉的情况，低温生物菌种，因而常常造成菌种的衰变，并有可能使优良菌种丢失。因此菌种保藏的重要意义就在于尽可能的保持其原有性状和活力的稳定性，还有确保菌种不死、不变异、不被污染，保持菌株优良性状不退化，保持优良菌株存活，以达到便于研究、交换和使用等诸方面的需要。

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