低温生物菌种的实验器材
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低温生物菌种的技术规程
1、安瓿管或冻存管的准备
用圆底硼硅玻璃制品的安瓿管,或螺旋口的塑料冻存管。
注意玻璃管不能有裂纹。
将冻存管或安瓿管清洗干净,121℃下高压灭菌15-20分钟,备用。
注意玻璃管不能有裂纹。
将冻存管或安瓿管清洗干净,121℃下高压灭菌15-20分钟,备用。
2、 保护剂的准备
保护剂种类要根据微生物类别选择。
配制保护剂时,应注意其浓度,一般采用10-20%甘油。
配制保护剂时,应注意其浓度,一般采用10-20%甘油。
3、 微生物保藏物的准备
微生物不同的生理状态对存活率有影响,低温生物菌种多少钱,一般使用静止期或成熟期培养物。
分装时注意应在无菌条件下操作。
菌种的准备可采用下列几种方法:
刮取培养物斜面上的孢子或菌体,与保护剂混匀后加入冻存管内;
接种液体培养基,振荡培养后取菌悬液与保护剂混合分装于冻存管内;
将培养物在平皿培养,形成菌落后,用无菌打孔器从平板上切取一些大小均匀的小块(直径约5-10毫米),真菌取菌落边缘的菌块,与保护剂混匀后加入冻存管内;
在小安瓿管中装1.2-2毫升的琼脂培养基,接种菌种,培养2-10天后,加入保护剂,待保藏。
4、 预冻
预冻时一般冷冻速度控制在以每分钟下降1℃为好、使样品冻结到-35℃。
低温生物菌种怎么保藏
菌种保藏(culture preservation,culture collection)是指保持微生物菌株的生活力和遗传性状的技术。
或经人工选育得到的变异型纯种,使其存活、不丢失、不污染杂菌、不发生或少发生变异,保持菌种原有的各种特征和生理活性。
基本原理是使微生物的生命活动处于休眠状态,也就是使微生物的新陈代谢作用限制在低范围内。
干燥、低温和隔绝空气是保证获得这种状态的主要措施。
有针对性地创造干燥、低温和隔绝空气的外界条件,就是微生物菌种保藏的基本技术。
常用的方法有冻干保藏法、深低温保藏法、液氮保藏法、矿油封藏法、固体曲保藏法、砂土管保藏法、琼脂穿刺保藏法等。
日常工作中,常选用4℃冰箱进行短时间的菌种保藏
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